Opossumer reproducerer seg flere ganger per år, med de fleste hunn som har opptil tre kull årlig, hvert med så mange som 13 unger. Gestasjonsperioden er kun 12 til 13 dager.
Ved fødsling er opossumer utrolig små – hver veier kun ca. 57 gram – og er rosa, harløse, og blinde. Mora overfører dem til pungen, der de fortsetter å utvikle seg i ca. to måneder. I de første 50 til 60 dagene lever de i pungen og ammes. Ved 4 ukers alder åpner øynene og ørene, og pels dekker kroppene deres.
Etter 60 til 90 dager begynner de å dukke opp og rida på mora sin rygg i ytterligere 2 til 3 måneder. De avvenes etter ca. 100 dager og forblir med mora til hun føder et nytt kull, hvorpå de er ca. 10 måneder gamle og kan passe seg selv.
Opossumer har høy spædbarnsdødelighet – omtrent 50 % – så flere store kull bidrar til å sikre artens overlevelse.