Præriehunder har mange fiender, både rovdyre og konkurrenter:
Rovdyre:
Pattedyr:
* Kojoter: Disse er de mest vanlige rovdyrene for præriehunder.
* Grepper: Grepper er dyktige gravere og kan rane præriehundehull.
* Svartfotet iller: Disse truede dyrene er nesten helt avhengige av præriehunder for mat.
* Rever: Både rødrev og kit-rever rovter præriehunder.
* Rødlynx: Rødlynx er oportunistiske jegere og tar præriehunder når de er tilgjengelige.
* Vesler: Langkroppede vesler er kjente for sin smidighet og kan jekte i præriehundehull.
* Tamhunde: Vildhunde kan utgjøre en trussel mot præriehundekolonier.
Fugler:
* Kongeørn: Kongeørn er store rovfugler som kan fange voksne præriehunder.
* Våkere: Rødhalet våke og rustvåke er vanlige rovdyre for præriehunder.
* Uller: Stor hornugle er nattaktig rovdyr som rovter præriehunder.
Reptiler:
* Slanger: Klyppeslanger og andre slanger kan jekte præriehunder, spesielt unge.
Konkurrenter:
* Andre præriehundearter: Forskjellige præriehundearter kan konkurrere om ressurser, spesielt når deres arealer overlapper.
* Storfe og annen husdyr: Husdyr kan beite på præriehundelivsmiljø og konkurrere om mat.
* Jordhuggule: Jordhugguler reirer ofte i forlatte præriehundehull, potensielt konkurrerende om plass.
Det er viktig å merke seg at de spesifikke rovdyrene og konkurrentene for præriehunder varierer avhengig av geografisk beliggenhet og livsmiljø.