1. Dingoer: Dingoer, introdusert til Australia av mennesker, er kjent for å bytte på mindre kjøttetende pungdyr. De antas å ha utvidet sitt utvalg til Tasmania og konkurrerte sannsynligvis med tylaciner om mat og territorium.
2. Mennesker: Mennesker var de viktigste rovdyrene til tylaciner. På grunn av deres oppfattede trussel mot husdyr, spesielt sauer, ble tylaciner aktivt jaktet og drept av nybyggere og bønder på 1800- og 1900-tallet. Dusører ble tilbudt for deres fangst eller ødeleggelse, noe som førte til en betydelig nedgang i befolkningen.
3. Europeiske sykdommer: Ankomsten av europeiske nybyggere førte med seg forskjellige sykdommer som påvirket tylacin-populasjonen. Spesielt hundevalpe var svært smittsom og dødelig for mange innfødte australske dyr, inkludert tylaciner.
4. Habitatødeleggelse: Utvidelsen av menneskelige bosetninger, landrydding for jordbruk og hogst bidro til tap og fragmentering av tylacines naturlige habitater. Dette begrenset deres evne til å finne mat, reprodusere og unngå rovdyr.
Mens det er beretninger om tylaciner som av og til unngår rovdyr ved å søke tilflukt i huler eller tett vegetasjon, førte den samlede virkningen av disse rovdyrene og menneskelig forfølgelse til artens endelige utryddelse.