Jakt og krypskyting: Selv om Florida-pantere er beskyttet under loven om truede arter, står de fortsatt overfor trusselen om ulovlig jakt og krypskyting. Noen mennesker dreper pantere for pelsen deres eller som gjengjeldelse for antatte trusler mot husdyr.
Sykdom: Florida-pantere er mottakelige for ulike sykdommer, inkludert felin leukemi, feline AIDS og hundevalpe. Disse sykdommene kan overføres fra huskatter og -hunder til pantere, og kan forårsake alvorlige helseproblemer og til og med død.
Innavl: På grunn av den lille populasjonsstørrelsen til Florida-pantere, er innavl en betydelig trussel mot deres genetiske mangfold. Innavl kan føre til redusert reproduksjonssuksess, økt mottakelighet for sykdommer og generelt redusert genetisk kondisjon.
Kjøretøykollisjoner: Florida-pantere krysser ofte veier og motorveier på jakt etter mat og territorium, noe som gjør dem sårbare for kollisjoner med kjøretøy. Disse kollisjonene kan forårsake alvorlige skader eller død for panterne.
Ulovlig handel: Florida-pantere blir noen ganger tatt til fange og solgt ulovlig som eksotiske kjæledyr eller for bruk på sirkus og andre underholdningssteder. Denne handelen utgjør en alvorlig trussel mot artens overlevelse.